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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下AKTA快速蛋白分離系統(tǒng)和HPLC的優(yōu)劣比較。HPLC優(yōu)點(diǎn):高壓速度快分析精度高所需樣本量少,主要用于分析純化多肽類(lèi)缺點(diǎn):柱子較貴有些需要用乙氰甲醇等有毒有害試劑不能或只能純化很小量的蛋白AKTA系統(tǒng)優(yōu)點(diǎn):中低壓容易放大可大規(guī)模純化蛋白類(lèi)常規(guī)只用無(wú)機(jī)鹽類(lèi)試劑可配備各種介質(zhì)純化不同蛋白可自己灌膠費(fèi)用較少缺點(diǎn):分析精度沒(méi)有HPLC高選用HPLC或AKTA的FPLC主要是依據(jù)你的用途而買(mǎi),分析用HPLC,大規(guī)模純化用FPLCFPLC...
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下蛋白純化通用問(wèn)題(二)。7、填料如何儲(chǔ)存?答:請(qǐng)參考說(shuō)明書(shū)。大部分填料可以在4-40℃儲(chǔ)存,不可以冷凍,注意北方的冬天有時(shí)候室溫低于零度,運(yùn)輸和儲(chǔ)存應(yīng)避免凍住。儲(chǔ)存過(guò)程中,注意避免填料干掉,或低溫產(chǎn)生氣泡。儲(chǔ)存液:對(duì)于耐堿的層析介質(zhì),可以使用0.01MNaOH作為儲(chǔ)存液;對(duì)于不耐堿比如親和介質(zhì),一般是用20%的乙醇或2%苯甲醇作為儲(chǔ)存試劑。8、樣品與緩沖液怎么脫氣和過(guò)濾?答:溶液和樣品必須過(guò)濾(0.2um或者0.45um的濾膜...
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下蛋白純化通用問(wèn)題(一)。1、層析柱的壽命多久,可以用多長(zhǎng)時(shí)間?答:填料的使用次數(shù)依據(jù)不同的目的和條件而有差異。在使用過(guò)程中注意操作規(guī)范,定期清潔維護(hù),可以使柱子保持*佳狀態(tài)。2、柱子堵了,超壓如何處理?答:可能原因:緩沖液或樣品未進(jìn)行過(guò)濾、蛋白沉淀或雜質(zhì)殘留、清洗不及時(shí)等引起層析柱濾膜堵塞;流速過(guò)快、流動(dòng)相粘度(如乙醇等)過(guò)高、溫度過(guò)低。建議處理方法:首先將柱子卸下來(lái),確定是系統(tǒng)還是柱子堵了。如果是柱子堵了:參考說(shuō)明書(shū)CIP操...
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下三種紫外吸收法測(cè)蛋白質(zhì)含量。1.280nm的光吸收法因蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm處具有**大吸收,且各種蛋白質(zhì)的這三種氨基酸的含量差別不大,因此測(cè)定蛋白質(zhì)溶液在280nm處的吸光度值是**常用的紫外吸收法。測(cè)定時(shí),將待測(cè)蛋白質(zhì)溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白質(zhì)溶液的溶劑(水或緩沖液)作空白對(duì)照,在紫外分光度計(jì)上直接讀取280nm的吸光度值a280。蛋白質(zhì)濃度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1...
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下蛋白質(zhì)純化系統(tǒng)方法經(jīng)典攻略(一):不迷路在結(jié)構(gòu)研究和體外生物化學(xué)分析等很多實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中都需要用到純化蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)可以從組織中獲取,亦或更經(jīng)常的是從模式生物中過(guò)量表達(dá)獲得,如細(xì)*菌、酵母或哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等。蛋白質(zhì)純化主要是根據(jù)它們各不相同的物理性質(zhì)來(lái)從原料進(jìn)行分離,其目的就是希望能浪費(fèi)*少的雜蛋白,獲得*多的功能蛋白質(zhì)。一個(gè)好的蛋白質(zhì)的純化過(guò)程必須要將其純化工藝步驟優(yōu)化至*少。蛋白質(zhì)純化工藝的建立建立蛋白質(zhì)純化工藝時(shí),*重要的...
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